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細胞轉染,細胞轉染是為了干嘛

時間:2026-02-24    作者:admin 點擊: ( 0 ) 次

一:

細胞轉染技術百科

問題1:感受態(tài)細胞的制備·轉化·細胞轉染·菌種培養(yǎng)相關方法及原理_百度知
答:7分裝保存(40%甘油與感受態(tài)細胞1:1混合,使甘油的終濃度為20%)。轉化1連接產物加入感受態(tài)中2冰上放置30分鐘342°90秒4冰上2-5分鐘5涂板~細胞轉染(這里說的是脂質體轉染,以六孔板為例,如果是。

問題2:什么細胞轉染方法可以轉染thp-1細胞?
細胞轉染答:thp-1轉染48小時熒光圖片轉染條件:培養(yǎng)板:24孔板轉染試劑用量:電訊質粒DNA用量:電訊轉染時間:48小時轉染試劑:AdvancedDNARNA轉染試劑培養(yǎng)基:z7180-500超低內毒胎牛血清。

問題3:細胞轉染慢病毒好還是腺病毒好
答:1轉染效率:慢病毒較高2慢病毒可以實現(xiàn)穩(wěn)定轉染,腺病毒是瞬時轉染3包裝量:慢病毒可以包裝4kb左右,不超過8kb的外源基因,腺病毒可以包裝8kb左右外源基因4慢病毒操作較方便,周期也短。但腺病毒表達快,1-2天。

問題4:哪種細胞轉染效率較高
答:個人經驗,BHK、CHO是很常用的轉染用細胞,而且跟抗體非特異性反應也不高。一般來說,大多數(shù)可傳代細胞的轉染效率都是可以的,還要考慮所用轉染劑的類型。不建議你用MDCK細胞,非常難轉染。

問題5:什么是細胞轉染
細胞轉染答:轉染(transfection)指真核細胞由于外源遺傳物質摻入而獲得新的遺傳標志的過程。如果摻入原核細胞叫轉化,使用病毒作為載體的叫感染。若此DNA未與宿主細胞DNA整合而獲表達,稱“瞬時轉染(transienttransfection)”;若與宿主細胞。

問題6:怎樣高效率轉染DC(DC24)細胞?
答:高效率轉染DC(DC24)細胞,和大家分享下面文章;2020-1-13四川大學胃腸癌中心國家重點實驗室用美國invigentech英克INVIDNARNATransfectionReagent轉染試劑成功轉染DC24細胞(小鼠骨髓來源樹突狀細胞)發(fā)表文章已經見刊;轉染體系:24。

問題7:293T細胞轉染
細胞轉染答:血清的存在會干擾siRNA與轉染試劑的混合,從而影響轉染效率。建議用來稀釋siRNA和稀釋轉染試劑的培養(yǎng)基是無血清培養(yǎng)基。我們實驗室前段剛用RFect,siRNA方法做完A549細胞,細胞的鋪板密度在45%左右,用的24孔板,每孔2ul試劑。

問題8:細胞轉染,挑單克隆
細胞轉染答:無限稀釋法,就是鋪到96板的一個孔,然后倍數(shù)稀釋下去,到最后就會有一個細胞的孔,還有就是細胞計數(shù),然后再鋪96孔,也會出現(xiàn)一個細胞,但是對于挑單克隆來說,我覺得沒必要單個細胞,單個細胞也不容易長起來,雖然挑克隆。

問題9:細胞轉染為什么不能加血清
答:傳統(tǒng)的轉染試劑有一定的細胞毒性,在轉染過程由于提高細胞的通透性因而不能在培養(yǎng)基中添加抗生素。如,陽離子脂質體。帶正電的脂質體與核酸帶負電的磷酸基團形成復合物被細胞內吞。血清中含有大量的蛋白質,在轉染過程中。

問題10:懸浮細胞的轉染怎么做
答:jinghuanlv認為:懸浮細胞和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。脂質體轉染的原理基于電荷吸引原理,先形成脂質體-DNA復合物,散布在細胞周圍,然后通過細胞的內吞作用,將目的基因導入細胞內,而脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會比。

二:

細胞轉染技術資料

問題1:細胞轉染目的,轉染成功證明什么?有什么意義
答:細胞轉染是指將外源分子如DNA,RNA等導入真核細胞的技術。隨著分子生物學和細胞生物學研究的不斷發(fā)展,轉染已經成為研究和控制真核細胞基因功能的常規(guī)工具。細胞轉染技術有助于研究和控制真核細胞基因功能。在研究基因功能、調控。

問題2:細胞轉染是孵育的目的是什么什么
答:DNA與轉染試劑孵育的目的:DNA和轉染試劑結合形成DNA-轉染劑復合物。DNA-轉染劑復合物與細胞孵育的目的:細胞吸收DNA-轉染劑復合物,進而DNA進入細胞。

問題3:為什么原代培養(yǎng)的細胞難轉染?適合原代細胞轉染的方法有哪些?
答:對原代培養(yǎng)的細胞,可以采用一下方法:非病毒載體,選擇比較好的轉染試劑,推薦QIAGEN的superfect轉染試劑,對原代細胞還可以。采用電轉。理論上任何細胞都可以通過電轉,不足之處:需要電轉儀器,緩沖液非常有講究,不同細胞。

問題4:細胞轉染后,再培養(yǎng)7或8天收集細胞,那么長時間,細胞不就擠死了嗎_百度
答:細胞轉染可以:(1)真核細胞可以摻入外源DNA而獲得新的遺傳標志;(2)應用于轉基因動植物;(3)應用于生物制藥、基因治療、RNA干擾。脂質體介導法實驗原理上圖所示是脂質體介導轉染的示意圖,它顯示了外源質粒進入細胞。

問題5:細胞轉染呈陽性是什么意思?
細胞轉染答:細胞轉染技術是指將外源分子如DNA,RNA等導入真核細胞的技術。隨著分子生物學和細胞生物學研究的不斷發(fā)展,轉染已經成為研究和控制真核細胞基因功能的常規(guī)工具。在研究基因功能、調控基因表達、突變分析和蛋白質生產等生物學試驗。

問題6:懸浮細胞的轉染怎么做
細胞轉染答:jinghuanlv認為:懸浮細胞和貼壁細胞轉染還是有很大不同的。脂質體轉染的原理基于電荷吸引原理,先形成脂質體-DNA復合物,散布在細胞周圍,然后通過細胞的內吞作用,將目的基因導入細胞內,而脂質體復合物與貼壁細胞的接觸機會比。

問題7:細胞轉染為什么要換無雙抗培養(yǎng)基?
細胞轉染答:影響細胞狀態(tài)吧,抗生素這種東西,即使是平時培養(yǎng)細胞的時候,能不加也最好不加,尤其是細胞轉染的時候,細胞更容易死,所以不要用雙抗。

問題8:U2OS細胞可以轉染嗎
細胞轉染答:可以。常用脂質體轉染法。脂質體是磷脂分散在水中時形成的脂質雙分子層,又稱為人工生物膜。陽離子脂質體表面帶正電荷,能與核酸的磷酸根通過靜電作用將DNA分子包裹入內,形成DNA一脂復合體,也能被表面帶負電荷的細胞膜吸附。

問題9:細胞共轉染實驗的詳細步驟求助
細胞轉染答:一般細胞轉染可以分開轉染也可以共同轉染,就看你們課題組的選擇了。我們課題組遇到需要干擾兩個基因的時候都選擇用RFECE,SIRNA技術分開轉染,弊端就是開支會比共同干擾要高,這個也要看你們課題組的經費情況。

問題10:細胞轉染目的,轉染成功證明什么?有什么意義
答:轉染一般是將目的基因構建到某個載體,將構建好的重組質粒導入細胞中,這樣就能表達你所要的目的蛋白用于后續(xù)實驗轉染可以得到細胞中本身不表達的蛋白或是能提高某些蛋白表達量。

三 :

細胞轉染名企推薦

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