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【摘要】 本發(fā)明涉及一種豬促卵泡激素β亞基基因單體 型的分離鑒定方法，屬于家畜分子生物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域。方法步驟 包括，提取豬的基因組DNA，豬促卵泡激素β亞基基因的 PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))擴(kuò)增，擴(kuò)增產(chǎn)物的多態(tài)性檢測(cè)，單體型 的構(gòu)建及其與豬繁殖性狀的相關(guān)性分析。本發(fā)明的特征是分離 鑒定出一個(gè)新的豬促卵泡激素β亞基基因的單體型H21。本發(fā) 明利用豬促卵泡激素β亞基基因的單體型與豬繁殖性狀顯著 相關(guān)的特性，為豬的標(biāo)記輔助選種和選配提供了新的分子標(biāo)記 方法。 【專利類型】發(fā)明申請(qǐng) 【申請(qǐng)人】上海交通大學(xué) 【申請(qǐng)人類型】學(xué)校 【申請(qǐng)人地址】200240上海市閔行區(qū)東川路800號(hào) 【申請(qǐng)人地區(qū)】中國(guó) 【申請(qǐng)人城市】上海市 【申請(qǐng)人區(qū)縣】閔行區(qū) 【申請(qǐng)?zhí)枴緾N200610029143.0 【申請(qǐng)日】2006-07-20 【申請(qǐng)年份】2006 【公開公告號(hào)】CN1900311A 【公開公告日】2007-01-24 【公開公告年份】2007 【IPC分類號(hào)】C12Q1/68 【發(fā)明人】潘玉春; 王起山; 李媛媛; 于丹丹; 李婧 【主權(quán)項(xiàng)內(nèi)容】1、一種豬促卵泡激素β亞基基因單體型的分離鑒定方法，其特征在于包括 如下步驟： 1)采集豬耳組織，利用苯酚/氯仿抽提方法提取基因組DNA； 2)針對(duì)豬促卵泡激素β亞基基因的αTaq？I單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)C/T，設(shè)計(jì)促卵 泡激素β亞基基因特異性引物，進(jìn)行PCR反應(yīng)，得到擴(kuò)增產(chǎn)物1；其中，所 述的基因特異性引物具有5’-TTGCTGGAAAGCCATCTG-3’和 5’-GGTACTTTCACGGTCTCG-3’的序列，所述的擴(kuò)增產(chǎn)物1長(zhǎng)度為 300～2000bp，且含有豬促卵泡激素β亞基基因的αTaq？I單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn) C/T； 3)針對(duì)豬促卵泡激素β亞基基因是否含有272bp的插入片段，設(shè)計(jì)豬促卵泡激 素β亞基基因特異性引物，進(jìn)行PCR反應(yīng)，得到擴(kuò)增產(chǎn)物2；其中，所述的 基因特異性引物具有5’-CCTTTAAGACAGTCAATGGC-3’和 5’-ACTGGTCTATTCATCCTCTC-3’的序列，所述的擴(kuò)增產(chǎn)物2長(zhǎng)度為 100～2000bp； 4)檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物1的αTaqI單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)C/T和擴(kuò)增產(chǎn)物2是否含有 272bp的插入片段的多態(tài)性； 5)構(gòu)建單體型，針對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物的多態(tài)性用統(tǒng)計(jì)分析的方法共分離鑒定出4種單 體型H12，H21，H11，H22； 6)通過偏回歸分析方法確定與豬繁殖性狀相關(guān)的單體型，其中，單體型H21 與初產(chǎn)活仔數(shù)顯著正相關(guān)，攜帶有上述單體型H21的個(gè)體初產(chǎn)活仔數(shù)性狀顯 著優(yōu)于含有其它單體型的個(gè)體； 其中所述的單體型H21在αTaq？I單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)C/T為C，且不含有 272bp的插入片段。 【當(dāng)前權(quán)利人】上海交通大學(xué) 【當(dāng)前專利權(quán)人地址】上海市閔行區(qū)東川路800號(hào) 【統(tǒng)一社會(huì)信用代碼】1210000042500615X0 【被引證次數(shù)】4 【被他引次數(shù)】4.0 【家族被引證次數(shù)】4

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